Autor o autores
SAINZ J, CÁLIZ R, HASSAN L, BLANCO A, GARCÍA F,
LÓPEZ FJ, SALVATIERRA J, PÉREZ MJ, GUZMÁN M,
COLLADO MD
E-Mail de Contacto
soanre@soanre.es
Centro
Hospital Universitario Virgen de las Nieves
Tema
Publicacion
Objetivos
La Artritis Reumatoide (AR) es una enfermedad inflamatoria crónica y
autoinmune que se caracteriza por una infiltración de las articulaciones
sinoviales con monocitos, células T y células polimorfonucleares, seguida de
una destrucción masiva de cartílago y hueso [1]. Los mecanismos
moleculares que determinan la progresión de la enfermedad aún no han sido
esclarecidos. Así pues, el objetivo de nuestro trabajo fue caracterizar el
patrón de expresión génica en pacientes con AR tardía e identificar los genes
implicados en los mecanismos moleculares que subyacen a la progresión de
la enfermedad.
Pacientes y Metodo
El diagnóstico de la AR de inicio y de la establecida se llevó acabo según los
criterios del ACR [1]. El ARN total se obtubo a partir de 10 ml de sangre
periférica utilizando tubos PAXgeneTM Blood RNA y RNAeasy kit de Quiagen,
en 2 pacientes con AR de inicio (<2 años de evolución) y en 2 pacientes con
AR establecida (>10 años de evolución) . El perfil de expresión génica se
estudió utilizando la plataforma de CodeLink Bioarray System (GE
Healthcare) con microarrays de genoma completo humano, que contienen
55.776 sondas de oligonucleótidos, según el protocolo de esta compañía,
después de comprobar la calidad del ARN total por electroforesis capilar. Los
microarrays fueron analizados en un escáner Genepix 4000B (Axon
Instruments) que posteriormente se procesó mediante el software CodeLink
Expression Analysis v4.0 (GE Healthcare).
Resultados
Inicialmente se ha comparado el perfil de expresión génica de pacientes con
AR establecida con el perfil de pacientes con AR de inicio. Se encontraron 62
genes sobre-expresados (>2fold) en pacientes con AR tardía y se clasificaron
funcionalmente en varios grupos:
METABOLISMO CELULAR PROTEICO (7 genes):
7a22h03x1 NCI_CGAP_GC6 cDNA clone IMAGE:3219509 3′;
qh70e03x1 Soares_fetal_liver_spleen_1NFLS_S1 cDNA clone
IMAGE:1850044 3′
df104d10y1 Morton Fetal Cochlea cDNA clone IMAGE:2540995 5′;
qf54h05x1 Soares_testis_NHT cDNA clone IMAGE:1753881 3′
mRNA for proteasome subunit HsC10-II, complete cds;
UI-CF-EC0-abh-j-20-0-UIs1 UI-CF-EC0 cDNA clone UI-CF-EC0-abh-j-20-0-UI 3′
NCI_CGAP_Kid3 cDNA clone IMAGp998C224149, clone IMAGE:5266106
REGULACIÓN DE LA TRASCRIPCIÓN (11 genes):
EST89970 Small intestine II Homo sapiens cDNA 5′ end;
oz41b09s1 Soares_NhHMPu_S1 cDNA clone IMAGE:1677881 3′
qg62e10s1 Soares_testis_NHT cDNA clone IMAGE:1839786 3′;
tz75b12x1 NCI_CGAP_Pan1 cDNA clone IMAGE:2294399 3′
zo23d12x5 Stratagene colon (#937204) cDNA clone IMAGE:587735 3′
UI-H-DT1-avy-j-12-0-UIs1 NCI_CGAP_DT1 cDNA clone IMAGE:5886059 3′;
KIAA0485 protein;
yi11a11s1 Soares placenta Nb2HP cDNA clone IMAGE:138908 3′;
yn50b07s1 Soares adult brain N2b5HB55Y cDNA clone IMAGE:171829 3′
yw28d08s1 Morton Fetal Cochlea cDNA clone IMAGE:253551 3′;
clone IMAGE:5266106
METABOLISMO DE BIOPOLÍMEROS (7 genes):
7a22h03x1 NCI_CGAP_GC6 cDNA clone IMAGE:3219509 3′
qf54h05x1 Soares_testis_NHT cDNA clone IMAGE:1753881 3′
mRNA for proteasome subunit HsC10-II, complete cds
KIAA0485 protein;
NCI_CGAP_Kid3 cDNA clone IMAGp998C224149; clone IMAGE:5266106;
clone IMAGE:4717361
AGENCOURT_7763267 NIH_MGC_92 cDNA clone IMAGE:6013351 5′
TRANSPORTE (7 genes):
qh70e03x1 Soares_fetal_liver_spleen_1NFLS_S1 cDNA clone
IMAGE:1850044 3′;
FXYD domain containing ion transport regulator 5 (FXYD5), mRNA
bx02b08x1 Human Iris cDNA (Un-normalized, unamplified): BX cDNA clone
bx02b08 3′;
KIAA0485 protein
UI-CF-EC0-abh-j-20-0-UIs1 UI-CF-EC0 cDNA clone UI-CF-EC0-abh-j-20-0-UI
3′;
orosomucoid 1 (ORM1), mRNA
UI-1-BB1p-avd-f-06-0-UIs1 NCI_CGAP_Pl6 cDNA clone UI-1-BB1p-avd-f-
06-0-UI 3′
COMUNICACIÓN CELULAR (9 genes):
EST89970 Small intestine II Homo sapiens cDNA 5′ end;
qh70e03x1Soares_fetal_liver_spleen_1NFLS_S1 cDNA clone
IMAGE:1850044 3′
HUM404E09B Human fetal brain (TFujiwara) cDNA clone GEN-404E09 5′;
bx02b08x1 Human Iris cDNA (Un-normalized, unamplified): BX cDNA clone
bx02b08 3′
yf97f06s1 Soares infant brain 1NIB cDNA clone IMAGE:30524 3′;
clone IMAGE:5266106
UI-CF-EC0-abh-j-20-0-UIs1 UI-CF-EC0 cDNA clone UI-CF-EC0-abh-j-20-0-UI
3′
yi11a11s1 Soares placenta Nb2HP cDNA clone IMAGE:138908 3′;
NCI_CGAP_Kid3 cDNA clone IMAGp998C224149
Además, en el análisis se encontraron 36 genes con otras funciones.
Conclusiones
Los genes sobreexpresados en AR establecida con respecto a la de inicio,
que funcionalmente están relacionados con procesos como el metabolismo
celular proteico, la regulación de la trascripción, el metabolismo de
biopolímeros, el transporte celular y la comunicación e interacción celular,
pueden tener un papel en la progresión de la AR.
BIBLIOGRAFÍA.
1. Arnett FC, Edworthy SM, Bloch DA, et al.: The American Rheumatism
Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis.
Arthritis Rheum 1988, 31: 315-324.
